Энэ нь пептид дээр байрлах Tyrr, Ser, Thr-ийг фосфоржуулж, амьдралын үйл явцад чухал үүрэг гүйцэтгэдэг.Фосфоржуулсан амин хүчлийг фосфорын хүчлийн пептидийн үйлдвэрлэлд ихэвчлэн ашигладаг бөгөөд одоогоор нэг фенил фосфоржуулсан амин хүчлүүдэд ашиглагддаг.HBTU/фосфоржуулсан амин хүчлүүд нь фосфоржуулсан амин хүчлийг HOBt/DIEA аргыг холбоход түгээмэл хэрэглэгддэг боловч фосфорын хүчлийн пептид нь энэ аргын согогийг сонгож байна, ялангуяа илүү урт пептидийн пептид эсвэл амин хүчлийн фосфатыг холбосон үр ашиг бага, бага байна. эцсийн бүтээгдэхүүний цэвэр байдал.Энэхүү фосфопептидын хувьд бид фосфоржилтын дараах сонгомол аргыг авч үзсэн.Үүсгэх процесс нь пептидийн синтезийн дараа шошголох шаардлагатай амин хүчлийн хажуугийн гинжин хэлхээний хамгаалалтын бүлгүүдийг сонгон зайлуулах явдал юм.Tyr-ийн хувьд Thr нь хамгаалалтгүй хажуугийн гинж бүхий амин хүчлийг ашиглан шууд урвалд орж чаддаг.-Ser (trt), 1% TFA /DCM орчинд тоон хэмжээгээр хасагдсан.
Фосфоризаци, давхар бензол фосфит фосфорамид, дөрвөн азотыг үүсгэсэн ба фосфорамидын тетразолийн идэвхтэй завсрын бодисууд нь гидроксид холбогдож, дараа нь хүчиллэг хэт исэл исэлдэлтийн дор фосфорын үүсэх, бүрэн урвал явагдана.
Одоогийн байдлаар пептидийн фосфоржуулсан өөрчлөлтийн арга нь хоёр үндсэн төрөл байдаг.
(1) дунд зэргийн баталгаатай фосфоржуулсан амин хүчлийг полипептидийн дараалалд шууд оруулах;
(2) пептидийн дараалал дээр үүссэн давирхайн дараа хажуугийн гинжин гидроксилыг Ser, Tyr эсвэл Thr фосфоржуулах.
1) дунд зэргийн баталгаатай фосфоржуулсан амин хүчлүүд нь пептидийн дарааллыг шууд нэвтрүүлнэ:
Өөрөөр хэлбэл, фосфоржих шаардлагатай амин хүчлийг (Thr, Ser эсвэл Tyr) ашиглан фосфоржуулж, зохих ёсоор хамгаалж, дараа нь фосфоржилтыг ердийн SPPS үүсгэх процесс дээр үндэслэн полипептидийн индексийг сонгох цэг хүртэл нарийсгах болно. .Энэ арга нь ажиллахад хялбар бөгөөд пептидийн үйлдвэрүүдийн фосфоржуулсан өөрчлөлтийн гол арга болжээ.
2) пептидийн дараалал дээр үүссэн давирхайн дараа Сер гидрокси фосфоржилт, Тир эсвэл Тр хажуугийн гинжин хэлхээнд:
Нэг агшилтын фосфоржилтыг полипептидийн аргаар фосфоржуулах чимэглэл нь хажуугийн гинжин хэлхээний чимэглэл дэх том бүлгүүдийн үүсгэсэн стерик саадаас болж амин хүчлүүдийн фосфоржилт нь пептидийн гинжин хэлхээтэй хамт агшихад хэцүү байдаг.Ирээдүйд амин хүчлийг нэвтрүүлэх нь илүү хэцүү байх болно, ялангуяа олон тооны фосфоржих газруудыг агуулсан чимэглэлд үүсэлт маш хэцүү болж, эцсийн бүтээгдэхүүний найрлага нь нарийн төвөгтэй, салгахад хэцүү, гарц нь маш бага байх болно.
Иймээс пептидийн гинжин хэлхээний олон хэсэг фосфоржсон үед давирхай дээр пептидийн дарааллыг үүсгэж, дараа нь Сер, Тир эсвэл Тр-ийн хажуугийн гинжин хэлхээний гидроксил бүлгээр фосфоржуулж болно: түүнийг үүсгэх нь голчлон давирхайг сонгон зайлуулдаг. пептидийн синтезийн дараа амин хүчлийг хүлээн зөвшөөрөх шаардлагатай хажуугийн гинжин хамгаалалтын бүлэг.Tyr-ийн хувьд Thr нь амин хүчлийн хажуугийн гинжийг шууд хэрэглэж болно, хариу үйлдэл үзүүлэхгүй.
Хажуугийн гинжийг хамгаалах суурь 1% TFA/DCM орчныг тоон хэмжээгээр арилгаж болно.Энэ аргыг сонгохдоо дибензилфосфорамидит ба тетразолиумыг ашиглан фосфорамидит тетразолийн идэвхтэй завсрын бүтээгдэхүүнийг үүсгэж, гидроксил бүлэгтэй холбож, улмаар исэлдүүлэн перокси хүчлийн орчинд фосфорын бүлгийг үүсгэж урвалыг дуусгах боломжтой.
Шуудангийн цаг: 2023 оны 9-р сарын 08-ны өдөр